Corante de ácido nucleico GoldView (10000×, solúvel em água)

This product is a cellular permeable nucleic acid binding dye that can replace ethidium bromide (EtBr, EB). When performing agarose gel electrophoresis, it emits strong green fluorescence after binding with double-stranded DNA and red fluorescence after binding with single-stranded DNA or RNA. The sensitivity is equivalent to EB and the method of use is exactly the same. Goldview is particularly suitable for the detection of large fragments (>1kb) de DNA, com sensibilidade reduzida em menos de 500pb.

Enviar e armazenar em temperatura ambiente; válido por 24 meses.

1. Método de tingimento em gel

um. Para preparar o gel, adicione 5-10 μL de corante de ácido nucleico GoldView (10,000 x, solúvel em água) por 50 mL de gel de agarose (recomendado GC205013) ao esfriar até não aquecer e misture bem, em seguida, despeje e espere que o gel de agarose solidifique completamente para a eletroforese da amostra.

b. Após a eletroforese, as observações foram feitas utilizando um sistema de imagem em gel ou transmissômetro de luz visível.

2. Método de tingimento por imersão

um. Eletroforese de acordo com métodos convencionais.

b. Dilua o corante de ácido nucleico GoldView (10000×, solúvel em água) para 1× (por exemplo, adicione 5 μL de solução estoque de corante de ácido nucleico GoldView 10000× a 50 mL de tampão de eletroforese 1×).

c. Coloque cuidadosamente o gel em um recipiente adequado e mergulhe o gel com uma quantidade suficiente de solução corante 1 x e incube-o por 10 minutos a 30 minutos em um shaker em temperatura ambiente, longe da luz. (o tempo específico depende da espessura do gel e da quantidade de ácido nucleico) Se for gel de acrilamida, incubado por 30min a 1h, e estendido com o aumento do teor de acrilamida.

d. Após o tingimento, se necessário, o gel pode ser agitado em água por 30 minutos para retirar a cor.

e. As observações são feitas utilizando sistemas de imagem em gel ou transmissômetros de luz visível.

1. O corante não precisa ser refrigerado em baixa temperatura. Guarde-o em temperatura ambiente, longe da luz.

2. Centrifugue imediatamente o produto no fundo do tubo antes de usar e, em seguida, realize experimentos subsequentes.

3. O principal componente do Goldview é a laranja de acridina, que possui permeabilidade celular e certa citotoxicidade.

4. Os géis contendo corantes de ácido nucleico Goldview não são adequados para experimentos de recuperação de gel.

5. O método de tingimento em gel reduz a mobilidade dos ácidos nucléicos.

6. A espessura do gel não deve exceder 0,5 cm, o gel muito espesso afetará a sensibilidade da detecção.

7. Não derreta repetidamente agaroses que já contenham Goldview, o que reduzirá a sensibilidade da detecção de ácido nucleico.

8. A solução de tingimento pode ser reutilizada cerca de 3 vezes, sendo recomendado armazenar a solução de tingimento usada que precisa ser usada continuamente longe da luz.

9. Recomenda-se que os operadores utilizem em áreas específicas, tomem medidas de proteção, usem luvas e máscaras e descartem adequadamente os resíduos.

Somente para uso em pesquisa!

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